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同一个体不同组织线粒体DNA异质性的研究 高林林

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发表于 2009-10-2 11:30 | 显示全部楼层 |阅读模式
同一个体不同组织线粒体DNA异质性的研究   
【作者】[url=]高林林[/url];
【导师】[url=]刘雅诚[/url]; [url=]王英元[/url];
【学位授予单位】[url=]山西医科大学[/url];
【学科专业名称】法医物证学
【学位年度】2006
【论文级别】硕士
【网络出版投稿人】山西医科大学
【网络出版投稿时间】2006-12-01
【关键词】线粒体DNA; 异质性; DHPLC; 法医学;
【英文关键词】Mitochondrial DNA; Heteroplasmy; Denaturing high-performance liquid chromatography; Senquencing; Forensic science;
【中文摘要】目的:建立变性高效液相色谱法(DHPLC)快速筛选同一个体不同组织线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)高变区异质型的方法;同时采用直接测序法验证其发生的频率,为利用mtDNA进行法医学鉴定时作出更加合理的结果解释提供参考。 方法:收集样本18例,分别提取血、心肌、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胰腺、脑组织、肌肉、皮肤、肋骨、指甲及毛发的mtDNA,共制备样本234份;并且在本实验室选取三个已知序列的样本Y1、Y2和Y3。在高变区选取两个多态性较好的区域即HV Ⅰ:nt16159-16391和HV Ⅱ:nt172-408,选用Gold~(TM) DNA聚合酶分别进行扩增并且优化扩增条件。用已知序列的样本建立两个区域各自最佳的DHPLC检测条件;采用DHPLC图谱和直接正反向测序法均相同的1#个体的所有样本建立筛选不同组织间异质型的模型。利用DHPLC筛选异质型样本,筛选出的异质型样本扩增更长的片段(包含目的片段)用ABI 310遗传分析仪进行正反向测序验证。 结果:DHPLC的最佳检测温度是HV Ⅰ:59.2℃,HV Ⅱ:55℃。D...
【英文摘要】Object ive : To establish the Denaturing High-Performance Liquid Chromatography(DHPLC) method that rapidly screening mitochondrial DNA heteroplasmy in control region between multiple tissues within the same individual at the same time,we used direct sequencing to confirm the frequency of heteroplasmy ,thus we can interpritate the results more reasonabaly by mtDNA analysis. Method: 234 samples from 18 individual were collected during autopsy, including blood, heart, liver, spleen, lung, kidney, pan...
【DOI】CNKI:CDMD:2.2006.105014
【更新日期】2007-01-10

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